一步法ELISA試劑盒核心原理基于雙抗體夾心法，將捕獲抗體預(yù)先包被于固相載體（如酶標(biāo)板），檢測(cè)抗體與酶結(jié)合形成復(fù)合物。實(shí)驗(yàn)時(shí)僅需加入樣本，即可同時(shí)完成抗原捕獲與酶標(biāo)記反應(yīng)，形成“固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物，后續(xù)通過(guò)顯色反應(yīng)實(shí)現(xiàn)定量或定性檢測(cè)。  

一步法ELISA試劑盒的技術(shù)優(yōu)勢(shì)  

操作簡(jiǎn)化  

傳統(tǒng)ELISA需分步加入捕獲抗體、樣本、檢測(cè)抗體及酶標(biāo)記物，而一步法將檢測(cè)抗體與酶預(yù)偶聯(lián)，并優(yōu)化包被工藝，使樣本添加后自動(dòng)觸發(fā)夾心反應(yīng)。

時(shí)間效率提升  

傳統(tǒng)ELISA檢測(cè)耗時(shí)3-4小時(shí)，而一步法可將時(shí)間縮短至1小時(shí)內(nèi)。

結(jié)果精準(zhǔn)可靠  

一步法通過(guò)預(yù)包被抗體與凍干標(biāo)準(zhǔn)品技術(shù)，減少人為操作誤差。

應(yīng)用場(chǎng)景拓展  

適用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等多種樣本類型，覆蓋炎癥因子、腫瘤標(biāo)志物、激素等檢測(cè)指標(biāo)。  

在工業(yè)自動(dòng)化生產(chǎn)中，一步法的簡(jiǎn)化流程與高重復(fù)性可降低設(shè)備故障率，提升生產(chǎn)線效率。  

注意事項(xiàng)  

樣本處理  

血清/血漿需離心去除顆粒物，避免堵塞酶標(biāo)板；細(xì)胞培養(yǎng)上清需低速離心去除細(xì)胞碎片。  

高濃度樣本可能因“鉤狀效應(yīng)”導(dǎo)致假陰性，需預(yù)先稀釋或選擇高靈敏度試劑盒。  

操作規(guī)范  

所有試劑需恢復(fù)至室溫（20-25℃）后再使用，避免溫度波動(dòng)影響酶活性。  

孵育過(guò)程中需嚴(yán)格避光，防止顯色底物提前分解。  

結(jié)果解讀  

若樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，需用樣本稀釋液調(diào)整后重新檢測(cè)。  

陰性對(duì)照孔OD值應(yīng)低于檢測(cè)限，否則可能存在污染或背景干擾。